福爾馬林固定石蠟包埋(Formalin Fixed Paraffin Embedded,FFPE)是醫學病理研究中保存臨(lin) 床組織樣本的標準方法,利用該方法存檔著大量生物樣品。FFPE 樣本承載著眾(zhong) 多疾病學信息,但因其 RNA 質量下降,轉錄本降解等原因,針對 FFPE 進行單細胞水平的研究一直困難重重。值得高興(xing) 的是,單細胞基因表達 Flex 技術(即單細胞 Fixed RNA)的出現解決(jue) 了 FFPE 樣本單細胞水平研究的難題,該技術使用探針雜交的方式,實現了在單細胞水平解鎖大量儲(chu) 存在醫院以及生物樣本庫中 FFPE 樣本的寶貴信息。
單細胞基因表達 Flex 技術利用包含上萬(wan) 個(ge) 特異性探針的專(zhuan) 用芯片來實現靶基因捕獲。在 FFPE 樣本經手動/自動化脫蠟解離後,芯片上帶 Probe Barcode 的探針與(yu) 獲得的細胞懸液進行雜交,探針上的 LHS 及 RHS 部分可直接捕獲靶基因,再通過 10x Genomics Chromium X 係統微流控通道與(yu) 含有 10x Barcode 的凝膠珠(Gel beads)結合,被油滴包裹形成油包水結構的微體(ti) 係(GEMs),從(cong) 而實現在單細胞水平上獲取FFPE樣本中保存的珍貴信息。
圖1 FFPE 樣本工作流程示意圖
目前,FFPE 樣本已經過多次實驗,選擇 15 個(ge) 不同類型人類組織 FFPE 樣本(包括人類肺癌、乳腺癌、睾丸FFPE樣本等),通過單細胞基因表達 Flex 技術進行單細胞轉錄組測序分析,最終獲得的基因數最高約 1500 個(ge) ,完全可以滿足後續細胞圖譜及差異表達等分析要求。具體(ti) 樣本類型、保存時間、樣本量、解離得到的細胞數等結果表現如下:
圖2 人體(ti) 組織 FFPE 樣本數據結果展示
圖3 浸潤性導管癌 FFPE 切片檢測得到的細胞類型、基因中位數等分析結果
作為(wei) 單細胞測序技術服務領域的佼佼者,AG九游会J9集团生物旗下AG九游会J9集团晶典在 2022 年取得了突出的成績。我們(men) 推出了單細胞基因表達 Flex(Fixed RNA)技術服務,解決(jue) 樣本的存儲(chu) 和運輸難題,實現了 FFPE 樣本開展單細胞測序的可能;引進了單細胞 CRISPR 篩選技術,通過分析數百個(ge) 不同的 CRISPR 擾動,了解某些基因的定量表達如何影響複雜的細胞表型和進程。更加值得稱讚的是,AG九游会J9集团晶典還補充了國有單細胞平台,自研了組織提核試劑盒,並強勢推出 CellScope 自有生信分析雲(yun) 平台,從(cong) 實驗和分析兩(liang) 個(ge) 層麵保障單細胞成果穩定產(chan) 出。2022年AG九游会J9集团晶典已經在單細胞及空間組學領域累計支持發文 130 餘(yu) 篇,總影響因子超過 2500 分,一年內(nei) 支持登頂三篇 Nature 期刊重磅文章!AG九游会J9集团晶典在單細胞方麵所做開拓性的產(chan) 品布局為(wei) 您的單細胞項目保駕護航,所取得的優(you) 異成績讓我們(men) 有充足的信心進一步服務好廣大客戶。
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